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| 詩文 | 制作生物玻片標本的技能 |
| 釋義 | 制作生物玻片標本的技能指將細小的生物體,或生物體的一部分器官組織,用一定方法處理后,封藏于載玻片和蓋玻片之間,制作成標本的技能。其制作方法有兩大類。一類是切片法,是用刀片或切片機將各種組織切成薄片制成玻片標本的方法。包括徒手切片法、石蠟切片法、火棉膠切片法和冰凍切片法。一類是非切片法,是將小形生物體或較大生物體的一部分不用刀切成薄片而制成玻片標本的方法。包括整體裝片法、涂片法、壓片法、分離法和磨片法。玻片標本薄而透明,借助顯微鏡能夠觀察生物的細微結構和內部構造,永久性玻片標片保存十幾年以上,仍能清晰地顯現(xiàn)出各種細微結構。掌握這一技能,對細胞學、組織學、胚胎學、病理學的教學和科研有著十分重要的作用。 運用制作玻片標本技能的基本步驟和要求是:①取材。要根據(jù)需要觀察和研究的內容,選取制作玻片標本的材料。②固定。將經(jīng)過選擇的材料立即用物理或化學的方法進行處理,以保持材料原有的特征和結構,有利保存和適于制片操作。物理方法固定可采用干燥、高熱和低溫驟冷等?;瘜W方法固定是用化學試劑配制成固定液固定。③染色。利用生物染色劑使玻片標本的組織或細胞的各種不同組成成分染上不同顏色,產生不同的折光率,使各部分結構在顯微鏡下清晰可辨。動物組織常用蘇木精、曙紅染色法,植物組織常用番紅、固綠染色法。④封藏。將處理好的材料,用封藏劑封藏在載玻片和蓋玻片之間保存起來。常用封藏劑是樹膠和甘油等。如果制作切片標本,還要增加一個切片的主要步驟,再根據(jù)需要增加脫水、透明等步驟。 運用制作玻片標本的技能必須注意:①制作玻片標本的材料要盡可能新鮮,切取材料時盡量不損傷材料,并詳細記錄材料名稱、采集時間和地點。②材料要及時固定,以防止組織自溶和腐敗。材料與固定液之比為1∶20,要在取材前根據(jù)材料的性質和制片目的選擇合適的固定液。③染色前要了解染色液的性質,染色后常在同樣的溶劑中洗去多余的染料。例如番紅溶解在50%的酒精中,沖洗也要在50%的酒精中進行。在兩重染色時,所用的染色液要有正確的先后次序。如蘇木精要用在番紅之前,番紅要用在亮綠或固綠之前。④使用無水封藏劑,如樹膠、香柏油等,標本一定要經(jīng)過徹底脫水后才能封藏,封藏的標本可以保存數(shù)十年。含水封藏劑如甘油,阿拉伯膠等,標本不需脫水即可封藏,但不能長期保存。切片進行脫水時,要在35%、50%、70%、83%、95%、100%各級濃度的酒精中逐級順序進行,脫水太快,不僅脫不干凈,還會損壞組織。脫水至純酒精時,要更換二次,每次30分鐘到1小時,如需過夜,要停在70%的酒精中。 |
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